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百欧博伟生物向您分享冻干菌株的复活和检查!

放大字体  缩小字体 发布日期:2020-06-29   来源:中国微生物菌种查询网   作者:百欧博伟 查看手机版   浏览次数:1069
百欧博伟生物向您分享冻干菌株的复活和检查!⒈复活菌株选择合适的培养基和培养条件(根据生产商说明)进行复活。冻干菌株的传代次数不得超过5代,从菌种保藏中心购买的冻干菌种为第0代。(1)细菌用
           百欧博伟生物向您分享冻干菌株的复活和检查!

⒈复活菌株

选择合适的培养基和培养条件(根据生产商说明)进行复活。冻干菌株的传代次数不得超过5代,从菌种保藏中心购买的冻干菌种为第0代。

(1)细菌

用无菌吸管吸0.5ml 液体培养基加到冻干菌块上,吹打混匀成悬液,将全部悬液移入含有5ml合适的肉汤培养基中。将管中残留的几滴悬液移种到斜面上。在合适的条件下培养,细菌培养温度通常为25℃或37℃。多数冻干菌株会在几天后长出,但是少数菌会表现出延滞期延长的现象,需要将正常培养时间加倍。

(2)噬菌体

首先应准备18h〜24h的宿主细菌培养物,往冻干噬菌体中加1.0ml肉汤(视宿主细菌而定)混匀,吸0.1ml悬液到0.9ml肉汤中,依次系列稀释。每个稀释度的稀释液一滴接种到预先准备好的平板上,每平板采用3个〜4个稀释度。过夜培养后可出现噬菌斑。

(3)霉菌和酵母菌

用无菌吸管吸0.5 ml〜1ml无菌水到冻干菌块上,将全部内容物移入装有5 ml,无菌水的试管中进行复水,2 h(或过夜)后移种到肉汤或固体琼脂上,在合适的温度下培养,真菌培养温度通常是25℃。少数培养物会表现出延滞期延长的现象,需要将正常培养时间加倍。

如菌株在推荐的培养基、培养温度和时间等适宜的条件下培养不生长,须灭菌处理之后方可丢弃。

⒉菌种纯度检査和确认

(1)菌落形态

取复活后的培养物,在相应的鉴别平板或普通非选择性平板上划线分离,培养出单菌落,观察菌落形态是否符合,同一平板上的单菌落的大小、形状、颜色、质地、光泽等是否相似;对于出现两种或以上形态的菌株,应再分别挑取单菌落划线或稀释涂布培养,检测是否重复出现相同特征。

(2)细胞形态

对数生长期的培养物的革兰氏染色反应应呈现一致性;细胞形状、大小、鞭毛、荚膜等特征应相似。

(3)芽孢大小、位置、形状

形成芽孢的菌种,其芽孢大小、位置、形状应相似。

(4)生化鉴定

必要时进行生化鉴定等实验。

(5)污染处理

如发现菌种有污染,需要分离挑选目标菌株培养成功后将污染培养物做灭菌处理。

北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物**到最终售后的确保项目准确到位,都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得最优质服务!也正因为此,北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系!

 
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